Apostle MiniMaxTM 高效游离RNA富集分离试剂盒

专为高效富集分离游离RNA而设计


介绍

虽然游离RNA在人体体液中的浓度非常低,却是很多疾病的重要的生物标志物,对于癌症诊断和治疗都有着重要意义。 血清或血浆的游离RNA长度通常在1000nt以下,miRNA的长度更是只有20nt左右,长度短,含量低,且容易降解。 应用我司专利的MiniMax纳米磁珠技术,Apostle MiniMaxTM 游离RNA分离试剂盒可以高效地富集和分离长度在17-1000nt的超低浓度的游离RNA。 该试剂盒不需要使用苯酚或者氯仿,安全快捷,分离得到的游离RNA可以直接进行测序和PCR等后续操作。

Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒相关数据

Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒可以高效地富集和分离生物样品中的RNA,对于小片段游离RNA(长度17-150nt)和在1000nt左右的较长游离RNA片段,都可以实现90%以上的富集分离效率(图1)。


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图 1. 超过90%的RNA富集分离效率(17-1000nt)

对于加入到血清和血浆中的RNA标准梯度(17-150nt 和 100-1000nt),Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒可以实现90%以上的回收效率。 图中红线表示富集回收前液,蓝线表示富集回收液,结果测量自BioAnalyzer 2100 (Agilent)。 (A) 长度在80-1000nt的RNA标准品。 (B) 长度在17-150nt 的RNA标准品。

Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒可以和多种采血管(BCTs)配合,高效富集分离血清中的游离RNA。 与市场上一种常用的基于柱子的竞品相比,经过多次验证,Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒可以更高效的富集分离游离RNA(1.1倍 - 2000倍,图2)。


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图 2. 与市场上一种常用的基于柱子的竞品相比,Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒对游离RNA的富集效率为1.1至2000倍。

从血清中富集分离游离RNA。 红线表示Apostle MiniMaxTM 试剂盒效率;绿线表示基于柱子法的竞品。 对比实验基于对外源的合成miRNA (cel-miR-39)的回收实现定量。 图中所示为qPCR扩增曲线和 CT 值。 如图,当采用K3EDTA采血管,cfRNA常用采血管产品1,和cfRNA常用采血管产品2时,Apostle MiniMaxTM 试剂盒的RNA富集效率分别为竞品的1.1倍,9倍,和2000倍。

基于血清样本中内源的mRNA和miRNA的富集分离实验更近一步证明Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒的卓越性能。 我们分别用Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒和基于柱子法的竞品,从200uL血清中富集分离游离RNA。 采血管分别采用K3EDTA采血管和其他厂商的游离RNA专用采血管。 我们用qPCR法,测量了富集分离出的Beta-globin,miR-21,miR-U6,和miR-15a。 结果显示,Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒的富集分离效率为竞品的1.1倍至480倍(图3-5)。


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图 3. Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒的富集效率为基于柱子法竞品的1.1倍到2.4倍。

从K3EDTA采血管保存的血清中富集分离游离RNA。 图中红线表示Apostle MiniMaxTM 试剂盒;绿线表示基于柱子法的竞品试剂盒。 应用qPCR法,图中所示为qPCR扩增曲线和 CT 值;分别测量富集分离出的游离RNA中的Beta-globin,miR-21,miR-U6,和miR-15a数值。 如图所示,Apostle MiniMaxTM 试剂盒的游离RNA富集效率为竞品的1.1倍至2.4倍。

图 4. Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒的富集效率为基于柱子法竞品的3.5倍到480倍。

从游离RNA专用采血管厂商1保存的血清中富集分离游离RNA。 图中红线表示Apostle MiniMaxTM 试剂盒;绿线表示基于柱子法的竞品试剂盒。 应用qPCR法,图中所示为qPCR扩增曲线和 CT 值;分别测量富集分离出的游离RNA中的Beta-globin,miR-21,miR-U6,和miR-15a数值。 如图所示,Apostle MiniMaxTM 试剂盒的游离RNA富集效率为竞品的3.5倍至480倍。
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图 5. Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒的富集效率为基于柱子法竞品的1.6倍到6倍。

从游离RNA专用采血管厂商2保存的血清中富集分离游离RNA。 图中红线表示Apostle MiniMaxTM 试剂盒;绿线表示基于柱子法的竞品试剂盒。 应用qPCR法,图中所示为qPCR扩增曲线和 CT 值;分别测量富集分离出的游离RNA中的Beta-globin,miR-21,miR-U6,和miR-15a数值。 如图所示,Apostle MiniMaxTM 试剂盒的游离RNA富集效率为竞品的1.6倍至6倍。
结论

综上所述, Apostle MiniMaxTM 高效游离RNA富集分离试剂盒对游离RNA拥有卓越的富集分离效率。 该试剂盒不使用苯酚或者氯仿,可以高效的富集和分离长度在17-1000nt的超低浓度的游离RNA。 实验证明,Apostle MiniMaxTM 游离RNA试剂盒适用于保存在各种常见采血管的样品,与防止RNA在储存过程中降解的游离RNA专用采血管配合效果最佳,可实现游离RNA的稳定提取。